可逆性永生化人肝细胞移植治疗CBDL-肝衰竭大鼠的研究

潘小平 杜维波 喻成波 吕国良 虞晓鹏 曹红翠 盛国平 李君 陈瑜 李兰娟#

#传染病诊治国家染病重点实验室  浙江大学医学院附属第一医院传染内科

摘要：

目的：基于Cre/LoxP重组系统的原理；采用细胞永生化技术，建立可逆性永生化的肝细胞系，为生物人工肝、肝细胞移植等治疗肝衰竭提供理想的细胞源。

方法：将含有SV40 LT基因的可逆性重组逆转录病毒载体转染到原代人肝细胞，建立可逆性永生化人肝细胞系；并对该细胞系的生物学特性及功能进行评价；以及进行可逆性人肝细胞移植治疗总胆管结扎（CBDL）-肝衰竭大鼠的研究。

结果：可逆性永生化人肝细胞系贴壁生长，呈椭圆形、梭形；RT-PCR结果显示：该细胞具有表达ALB、GST、HBCF-x等肝细胞的生物学功能，以及具有肝细胞色素P450功能。体外药物代谢的实验结果显示：该细胞具有安定转化、代谢利多卡因等功能。可逆性永生化人肝细胞移植治疗CBDL-肝衰竭大鼠的实验结果显示：与CBDL-肝衰竭模型组比较，可逆性永生化人肝细胞移植治疗具有明显改善大鼠肝功能的指标，以及延长大鼠的生存时间。结论：可逆性永生化人肝细胞系具有原代人肝细胞的生物学特性和功能、以及肝细胞色素P450酶功能，可逆性永生化人肝细胞移植具有明显改善CBDL-肝衰竭大鼠的肝功能指标，以及延长肝衰竭大鼠的生存时间；将为生物人工肝、肝细胞移植等治疗肝衰竭提供了理想的细胞源。